Astrakhan, Astrakhan, Russian Federation
Astrakhan, Astrakhan, Russian Federation
Russian Federation
The aim of the study was to study the effect of the extractant on the completeness of the yield of biologically active substances in the development of an extraction form based on the leaves of Elaeagnus argentea. Materials and methods. The objects of the study were extracts of Elaeagnus argentea leaves obtained in a ratio of 1:5 by infusing in a water bath at a temperature of 60 °C for 2 hours with periodic stirring. Purified water and ethyl alcohol in concentrations of 40, 50, 60, 80 and 96 % were used as extractants. The completeness of the BAS yield was estimated by the “dry residue” indicator and the amount of flavonoids and saponins in terms of luteolin-7-glucoside (CAS No. 5373-11-5, purity of the base substance more than 98 %) and oleanolic acid (CAS No. 508-02-1, purity of the base substance more than 99 %), respectively. Results. As a result of the study, it was found that the highest dry residue index, the amount of scrip of flavonoids and saponins were determined in the extraction, where ethyl alcohol of 60% concentration was used as an extractant. Conclusion. Thus, when extracting based on the leaves of Elaeagnus argentea, it was found that the optimal extractant is ethyl alcohol 60 %, when used, the highest value of the "dry residue" indicator and the amount of flavonoids and saponins are noted.
extraction, extractant, biologically active substances, dry residue, Elaeagnus argentea
В настоящее время исследователи проявляют постоянно возрастающий интерес к проблемам разработки новых эффективных лекарственных средств на основе растительного сырья. Принимая во внимание тот факт, что лечение различных заболеваний требует многовекторного воздействия на различные патогенетические механизмы, применение растительных препаратов является перспективным направлением [1]. Интерес в качестве сырьевого источника для фитопрепаратов представляет растение рода лох Elaeagnus argentea, произрастающий на территории Астраханской области. Исследования показали, что листья Elaeagnus argentea содержат аскорбиновую кислоту не менее 0,31 %, флавоноиды в пересчете на лютеолин-7-глюкозида – не менее 1,89 %, сапонинов в пересчете на олеаноловую кислоту – не менее 2,18 % [2, 3]. Установлено, что извлечения из различных частей данного растения способны оказывать противовоспалительную, регенераторную, антиоксидантную, противомикробную и другие виды активности [4, 5]. Выраженность фармакологического действия фитопрепаратов зависит от полноты выхода биологически активных веществ (БАВ), поэтому изучение влияния различных факторов на процессы экстракции растительного сырья является актуальным. Цель: изучить влияние экстрагента на полноту выхода биологически активных веществ при разработке экстракционной формы на основе листьев Elaeagnus argentea. Материалы и методы исследования. В качестве объектов исследования использовали извлечения листьев Elaeagnus argentea, полученные в соотношении 1 : 5 путем настаивания на водяной бане при температуре 60 °С в течение 2 ч при периодическом перемешивании. В качестве экстрагентов использовали воду очищенную и спирт этиловый в концентрациях 40, 50, 60, 80 и 96 %. Перед настаиванием листья были измельчены до размера частиц 3 мм, что соответствует требованиям ОФС.1.4.1.0018.15 «Настои и отвары». Полноту выхода БАВ оценивали по показателю «сухой остаток» и определяли по методике указанной в ОФС.1.4.1.0019.15 «Настойки»: полученные извлечения в объеме 5 мл помещали в бюкс, предварительно подготовленный и взвешенный с точностью до 0,0001 г; выпаривали досуха в сушильном шкафу в течение 2 ч; охлаждали в эксикаторе в течение 30 мин; взвешивали. В полученных извлечениях было определено количество флавоноидов и сапонинов в перерасчете на лютеолин-7-глюкозид (CAS № 5373-11-5, чистота основного вещества более 98 %) и олеаноловую кислоту (CAS № 508-02-1, чистота основного вещества более 99 %) соответственно. Оптическую плотность определяли на спектрофотометре ПЭ-5400В (ЗАО «НПО Экрос», Россия). Все исследования проводили в 5-кратной повторности. Результаты исследования и их обсуждение. В таблице 1 представлены результаты изучения влияния экстрагента на величину сухого остатка в экстракционных формах на основе листьев Elaeagnus argentea. Таблица 1. Влияние экстрагента на количество сухого остатка в экстракционных формах на основе листьев Elaeagnus argentea Table 1. Effect of extractant on the amount of dry residue in extraction forms based on Elaeagnus argentea leaves Сухой остаток, % Экстрагент Вода очищенная Спирт этиловый, % 40 50 60 80 95 1,8 1,9 2,3 2,9 2,7 2,7 55 В результате проведенного исследования установлено, что наибольший показатель сухого остатка определен в извлечении, где в качестве экстрагента использовали спирт этиловый 60 % концентрации. В таблице 2 представлены результаты изучения влияния экстрагента на количество флавоноидов в экстракционных формах на основе листьев Elaeagnus argentea. Таблица 2. Влияние экстрагента на количество флавоноидов в экстракционных формах на основе листьев Elaeagnus argentea Table 2. Effect of extractant on the amount of flavonoids in extraction forms based on Elaeagnus argentea leaves Сумма флавоноидов, % Экстрагент Вода очищенная Спирт этиловый, % 40 50 60 80 95 0,37 0,41 0,56 1,12 1,07 0,51 Результаты изучения влияния экстрагента на количество БАВ в экстракционных формах на основе листьев Elaeagnus argentea показали, что наибольший выход флавоноидов наблюдается в извлечении, полученном на спирте этиловом 60 % концентрации. В таблице 3 представлены результаты изучения влияния экстрагента на количество сапонинов в экстракционных формах на основе листьев Elaeagnus argentea. Таблица 3. Влияние экстрагента на количество сапонинов в экстракционных формах на основе листьев Elaeagnus argentea Table 3. Effect of extractant on the amount of saponins in extraction forms based on Elaeagnus argentea leaves Сумма сапонинов, % Экстрагент Вода очищенная Спирт этиловый, % 40 50 60 80 95 1,12 1,32 1,72 1,87 1,36 1,46 Результаты изучения влияния экстрагента на количество БАВ в экстракционных формах на основе листьев Elaeagnus argentea показали, что наибольший выход сапонинов наблюдается в извлечении, полученном на спирте этиловом 60 % концентрации. Полученные результаты можно объяснить, опираясь на физико-химические свойства БАВ. Установлено, что флавоноиды, в частности дигликозиды, к которым относится лютеолин-7-глюкозид, и сапонины хорошо растворимы в органических растворителях, в том числе и 60 % спирте [6–8]. Принимая во внимание результаты определения сухого остатка, который косвенно характеризует содержание водо- и спирторастворимой фракции извлекаемых веществ в исследуемых извлечениях, можно заключить, что оптимальным экстрагентом является спирт этиловый 60 % концентрации. Заключение. При получении извлечения на основе листьев Elaeagnus argentea установлено, что оптимальным экстрагентом является спирт этиловый 60 %, при применении которого отмечается наибольшая величина показателя «сухой остаток» и количество флавоноидов и сапонинов.
1. Karomatov I. D. Hippophae – a therapeutic and prophylactic remedy of folk and scientific medicine. Biologiya i integrativnaya meditsina = Biology and Integrative Medicine. 2017; 8: 41–73. (In Russ.).
2. Salnikova N. A., Shur Yu. V., Tsibizova A. A. Phytochemical analysis of Elaeagnus argentea leaves. Razrabotka i registratsiya lekarstvennykh sredstv = Drug Development and Registration. 2021; 10 (3): 95–99. doi:https://doi.org/10.33380/2305-2066-2021-10-3-95-99. (In Russ.).
3. Carradori S., Cairone F., Garzoli S., Fabrizi G., Iazzetti A., Giusti A. M., Menghini L., Uysal S., Ak G., Zengin G., Cesa S. Phytocomplex characterization and biological evaluation of powdered fruits and leaves from Elaeagnus angustifolia. Molecules. 2020; 25 (9): 1–19. doi:https://doi.org/10.3390/molecules25092021.
4. Salnikova N. A., Tsibizova A. A., Shur Yu. V. Prospects for the use of plants of the genus Elaeagnus in the pharmaceutical and food industry. Byulleten nauki i praktiki = Bulletin of Science and Practice. 2018; 4 (12): 134–147. (In Russ.).
5. Sadyrova M. A., Karomatov I. D., Amonov M. K. U. Medical significance of the plant Eleven angustifolia. Biologiya i integrativnaya meditsina = Biology and Integrative Medicine. 2017; 5: 154–162. (In Russ.).
6. Dias M. C., Pinto D. C., Silva A. M. (). Plant flavonoids: Chemical characteristics and biological activity. Molecules. 2021; 26 (17): 5377. doi:https://doi.org/10.3390/molecules26175377.
7. Karak P. Biological activities of flavonoids: An overview. International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research. 2019; 10 (4): 1567–1574. doi:https://doi.org/10.13040/IJPSR.0975-8232.10(4).1567-74.
8. El Aziz M. M. A., Ashour A. S., Melad A. S. G. A review on saponins from medicinal plants: chemistry, isolation, and determination. Nanomedicine Research Journal. 2019; 8 (1): 6‒12. doi:https://doi.org/10.15406/jnmr.2019.08.00199.